Browsing by Author "Quintana, Silvina"

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    Desarrollo de una técnica de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR), con EVAGREEN como agente intercalante, para la detección del virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV) en crustáceos
    (Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP), 2016) Jurquiza, Verónica; Quintana, Silvina
    El virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV) es uno de los principales patógenos que afectan al camarón y otros crustáceos. La enfermedad es de curso agudo y la tasa de mortalidad puede llegar a ser del 100%; según las normas del Código Acuático de la OIE, en caso de ocurrir, debe ser declarada obligatoriamente. Actualmente, no existen tratamientos terapéuticos disponibles para prevenir o reducir los efectos del virus y la vigilancia como así también, las diferentes metodologías implementadas para su detección brindan apoyo y fortalecimiento a la industria y han sido fuertemente recomendadas. Varios métodos se han desarrollado para detectar el WSSV; desde el año 2010, en el Gabinete de Biología Molecular y Microbiología del INIDEP, se utiliza el kit de diagnóstico IQ2000TM WSSV, basado en la detección del WSSV por la técnica de PCR anidada. En muestras de langostino (Pleoticus muelleri), el kit funciono bien; sin embargo en muestras de camarones (Artemesia longinaris) no fue posible poner a punto el método y se determinó la necesidad de implementar la técnica de RT-PCR (Reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real). Por otro lado, el Laboratorio Fares Taie solicitó colaboración al INIDEP para implementar la detección del WSSV en muestras de productos pesqueros utilizados en la alimentación de camarones de cultivo. Considerando el convenio celebrado entre Fares Taie Laboratorio de Análisis y el INIDEP, se acordó realizar un trabajo en colaboración, con el objetivo de desarrollar y optimizar un método de diagnóstico con alta sensibilidad, especificidad y más accesible para la investigación y el diagnóstico de rutina, basado en la utilización de la técnica de RT-PCR con agentes intercalantes. Se aplicó la metodología aprobada por la OIE (2016), para la Enfermedad de la Mancha Blanca, con modificaciones. Se utilizó EvaGreen como agente intercalante y el gen 18s (ADNr) como control interno de amplificación en las muestras analizadas. La utilización de la técnica de RT-PCR con agentes intercalantes permite ofrecer una metodología segura en la detección del WSSV. Este trabajo ofrece una herramienta de diagnóstico optimizada para la detección rápida del WSSV.
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    Desarrollo y optimización de métodos moleculares para la identificación del genotipo 1 del virus de la cabeza amarilla (veca1) en crustáceos del mar argentino y en productos pesqueros destinados a exportación
    (Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP), 2018) Jurquiza, Verónica; Giustina, Silvina; Quintana, Silvina
    El genotipo 1 del virus de la cabeza amarilla (VEGA 1 ), es el único agente causal de la enfermedad de la cabeza amarilla en crustáceos y es uno de los ocho genotipos del complejo del vi rus de la cabeza amarilla. La enfermedad es una infección sistémica de notificación obligatoria, que registra una elevada tasa de mortalidad e importantes pérdidas económicas en las granjas de cultivo de camarón . En Argentina no sehan detectado casos de enfermedad ni se ha reportado la presencia del virus: sin embargo. debido a la importancia de la pesquería del langostino patagónico autóctono (Pleoticus muellen). que en su mayoría se destina a exportación , se considera relevante reforzar la calidad sanitaria de este recurso. El presente trabajo fue un desarrollo en· conjunto entre el Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP) y Laboratorio Fares Taie, con la colaboración del Servicio Nacional de Sanidad Animal(SENASA). Se optimizaron métodos moleculares para la detección e identificación del VEGA 1, de acuerdo a las recomendaciones de la Organización Mundial de Sanidad Animal (O IE). Se logró generar y transferiruna herramienta de diagnóstico rápida y de alta sensibilidad, se implementaron las técnicas de RT-qPGR con Eva Green como agente intercalante para el diagnóstico y posteriormente la secuenciación para la diferenciación de genotipos del complejo VEGA.