Optimización de PCR Multiplex para el genotipado de microsatélites en Engraulis anchoita
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Date
2015
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Publisher
Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP)
Abstract
La obtención de microsatélites implica esfuerzo, tiempo y costos elevados debido a la cantidad de marcadores que deben obtenerse para estudios poblacionales, siendo 20 un número ideal. Un modo de reducir insumos y trabajo es mediante la amplificación de varios microsatélites en un solo ensayo. Se han diseñado y estandarizado 3 PCR multiplex para un total de 10 microsatélites con las que posteriormente se analizarán las muestras de Engraulis anchoita de distintas zonas de su distribución. Los marcadores seleccionados, a partir de la totalidad de 41 microsatélites obtenidos, fueron primero optimizados y amplificados individualmente. Luego fueron combinados según una temperatura de alineamiento óptima y posteriormente amplificados usando la técnica de PCR multiplex, verificando que no hubiera superposición en el tamaño de sus productos. Así se logró reducir la cantidad de ensayos (de 10 a 3), lo que redundará economía de tiempo y recursos económicos
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Citation
Trucco, M.I.; Salomone, A.L. (2015). Optimización de PCR Multiplex para el genotipado de microsatélites en Engraulis anchoita (Informe de Investigación, No. 2). Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP)